蛋白酶K

蛋白酶K具有非特异性的降解**蛋白质的能力 
 
摘要：蛋白酶K一种非特异性很高的比活性，它还具有降解**蛋白质的能力，应用范围很广，下面就细细讲解。
**、蛋白酶K一种非特异性很高的比活性

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蛋白酶K广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面。一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶，具有很高的比活性。一般储存在-20°C，避光防潮密闭干燥蛋白酶是所有能够催化分解蛋白质的酶类的统称，而蛋白酶K则是**一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的降解，比如在提取DNA时溶解DNA的水中就有一定量的蛋白酶K。所以它们不属于同一个产品。
第二、蛋白酶K降解**蛋白质的能力

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蛋白酶K，是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解**蛋白质的能力，因而它应用很广泛，包括制备脉冲电泳的染色体DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50-100μg/ml。在较广的pH范围内（pH 4-12.5）均有活性。
第三、蛋白酶K应用范围

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蛋白酶K已广泛应用在皮革、毛皮、丝绸、医、食品、酿造等方面。皮革工业的脱毛和软化已大量利用蛋白酶，既节省时间，又改善劳动卫生条件。蛋白酶还可用于蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。临床上可作用，如用胃蛋白酶**消化不良，用酸性蛋白酶**支气管炎，用弹性蛋白酶**脉管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对外科化脓性创口的净化及胸腔间浆膜粘连的**。加酶洗衣粉是洗涤剂中的新产品，含碱性蛋白酶，能去除衣物上的血渍和蛋白污物，但使用时注意不要接触皮肤，以免损伤皮肤表面的蛋白质，引起皮疹、湿疹等过敏现象。
第四、蛋白酶K用途

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用途: 分离DNA和RNA期间使核苷酸酶蛋白失活。 去除内毒素对阳离子蛋白的约束，如溶菌酶和核糖核酸酶。 研究报告显示用于分离肝，酵母，绿豆线粒体 测定细胞膜上的酶 用于抗体标记，石蜡包埋组织切片中暴露抗原结合位点。 消化脑组织样本中的蛋白质，用于朊病毒的传染性海绵状脑病的研究。
第五、蛋白酶K杂交前的处理

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蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果。
 来源：蛋白酶/news/show-72360.html